【储存条件】 干冰运输，-20 ℃保存。
【产品简介】
NanoCipher plus转染试剂盒是基于内源蛋白自组装形成的纳米颗粒结构的新型基因递送工具，专门针对原代细胞及难转染细胞系研发，通过独特的非病毒、非电转、非脂质体技术显著提升外源基因的递送效率和表达水平。该试剂可安全高效地递送mRNA、siRNA、DNA等多种核酸，仅需5-15分钟即可将核酸递送至细胞内，最快在1小时内即可检测到mRNA的高效表达。
【产品组分】
【适用范围】
适用于多种原代细胞与难转细胞系，包括：人原代T细胞、人原代NK细胞、人原代单核细胞、人原代CD34+造血干细胞、小鼠原代心肌细胞、小鼠原代神经元、小鼠原代神经胶质细胞、大黄鱼原代间充质干细胞、人T淋巴细胞白血病细胞、人肝星状细胞、人肝肿瘤细胞、人急性单核细胞白血病细胞系、人Burkitt淋巴瘤细胞、人慢性粒细胞白血病细胞、人T淋巴细胞白血病细胞、人神经母细胞瘤细胞系、人骨肉瘤细胞、人类淋巴瘤细胞、人皮肤成纤维细胞、人胚胎肾细胞系、小鼠结肠癌细胞、小鼠单核巨噬细胞白血病细胞、小鼠 Lewis肺癌细胞、小鼠成肌细胞、猴肾细胞系。
【需自备试剂】
1.待转染细胞：转染前细胞必须处于良好的生长状态，活率>90%；对于原代细胞，建议在转染前进行适当的活化处理，以提高转染效果。例如，人原代T细胞可使用激活磁珠或抗体激活2-10天，小鼠原代T细胞激活2-4天。
2.Opti-MEM 培养基（提前预热或恢复至室温）、完全培养基、无菌EP管、所需转染的核酸样品。
【操作示例】
一．以96孔板转染mRNA为例
二．转染不同类型核酸的操作示范（以96孔板转染为例）
【注意事项】
1.在进行细胞处理时，尽量去除FBS，因血清中的蛋白质等成分可能与转染试剂结合形成复合物，阻碍核酸进入细胞，从而降低转染效率。
2.建议mRNA浓度≥1μg/μL；如需同时转染多个mRNA，加入的mRNA总量不超过0.5µg以维持高效转染。
3.建议siRNA 浓度≥20μM；如需同时转染多个siRNA，加入的siRNA总量不超过40 pmol（细胞系）或20 pmol（原代细胞）以维持高效转染。
4.建议DNA浓度≥0.5μg/μL；如需同时转染多个DNA，加入的 DNA 总量不超过0.4 μg以维持高效转染；注意：转染效率与DNA纯度密切相关，推荐使用无内毒素试剂盒制备DNA并控制OD值在1.7-1.9间，以无核酸酶纯水将DNA稀释至0.5-2 µg/µL浓度，可提升转染效率并减少细胞损伤。
5.质粒DNA转染原代细胞可能通过激活cGAS-STING信号通路介导的炎症反应等细胞毒性机制，导致免疫细胞存活率显著下降。基于此，原代T细胞等免疫效应细胞在基因工程改造中应避免使用双链DNA递送系统，推荐采用mRNA或siRNA等非整合型核酸分子进行转染。
附录一：转染不同细胞培养孔板规格的各组分使用含量
附录二：NanoCipher plus转染试剂盒可成功转染以下细胞系和核酸类型，也广泛适用于其他多种细胞
