【储存条件】 -20˚C。
【产品简介】
MazF作为大肠杆菌（Escherichia coli）II型毒素-抗毒素系统的毒素组分，是一种特异性识别单链RNA中ACA序列的核糖核酸内切酶，其切割位点位于ACA三联核苷酸的5'末端磷酸二酯键（5′-N↓ACA-3′），而对双链RNA、双链DNA及单链DNA均无酶切活性。该酶通过精确的底物识别机制，催化RNA链断裂并形成2′,3′-环磷酸和5′-羟基末端产物，其切割活性受RNA二级结构及m6A甲基化修饰的显著抑制。这种特性使其成为RNA表观遗传分析（如m6A甲基化检测）和mRNA药物序列验证的重要工具。与DNA限制性内切酶不同，MazF的催化反应不依赖镁离子，且在中性pH条件下即可高效完成。
【适用范围】 高分辨率m6A甲基化分析、mRNA 药物序列分析。
【产品组分】
【操作示例】
1.在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系：
2.ssRNA 在37℃中保温15 min被完全切断。
【活性定义】 1活性单位(U)是指在37℃温度和pH7.5 条件下，将1 pmoL的标准底物 ( ROX-5'-GATAUACATATCT-eclipse；下划线部分是RNA序列 ) 在 10 min内完全分解的酶量。
【质量控制】
1.蛋白纯度：
经SDS-PAGE凝胶电泳检测，蛋白纯度不低于95%。
2.RNase活性：
将20 U MazF与40 ng ssRNA在37℃温育1 h，使用琼脂糖凝胶电泳检测，ssRNA片段无变化。
3.DNase活性：
将20 U MazF与15 ng双链 DNA在37C温育16 h，使用琼脂糖凝胶电泳检测，DNA片段无变化。
【注意事项】
1.本酶特异性切断含ACA 序列的ssRNA，但是也会受AC位点两侧序列的影响可能切断AC位点。
2.本酶不能切断 dsRNA。因此，由于RNA二级结构的影响，本酶不能切断所有的ACA位点序列。
3.在反应液中添加盐，特别是Mg2+等二价阳离子时，本酶的活性会受到抑制。DTT不影响反应液中的酶活性。
4.本酶切断的片段不能使用RNA Ligase直接进行连接反应，因为片段的两个末端分别是2', 3'-cyclic phosphate和5'-OH。
