★基本原理
DNA 电泳是一种常用的实验室技术，可鉴定、定量和纯化核酸片段。将 PCR 产物上样到琼脂糖凝胶或丙烯酰胺凝胶的孔内并加上电场，使带负电荷的核酸向正极移动。较短的 DNA 片段迁移较快，而较长的片段迁移较慢，从而实现基于 DNA 片段大小的分离。
★实验步骤
1. 取材：
待鉴定小鼠，剪取0.5cm脚趾或尾巴，放入 1.5mL EP管中，待鉴定。
2.DNA 抽提，纯度鉴定：
① 组织消化：按样本数量配制组织消化液，组织消化液现配现用，充分混匀后使用。
② 向每个含有样本的EP管中加入100uL 新鲜组织消化液，55℃水浴/金属 浴中消化 30min。组织消化时，务必将组织完全浸没于消化液中。消化完成后，组织外观仍然完整，但足量的基因组 DNA 已经释放，不影响后续的PCR实验。将样本置于95℃水浴/金属浴中孵育 5min 以灭活消化液中的蛋白酶活性。消化后的上清或连同组织的消化液可于-20℃保存三个月。
推荐使用welcome欢迎光临威尼斯生物DNA抽提试剂盒和动物组织(含鼠尾）直接PCR试剂盒
③ 吸光度法鉴定 DNA 抽提的质量
3. PCR：
按照protocol配制反应体系，配制最好于低温环境下（如冰浴）完成，以保证PCR扩增效率和扩增特异性。
PCR反应条件参照待鉴定的转基因小鼠的说明书。
4. 凝胶电泳，紫外成像：
PCR 产物可直接点样进行琼脂糖凝胶电泳，凝胶成像。
5. 结果判读
条带判读：WT：仅有 WT 条带
KO：仅有 KO 条带
杂合子：同时有两条条带
DNA 分子大小的估计：利用已知大小的 DNA 片段作标准（marker），目的片段与之比对估计。
